激光共聚焦顯微鏡的光路係統是其核心組成部分,它決定了顯微鏡的成像質量和分辨率。以下是激光共聚焦顯微鏡光路係統的詳細組成介紹:
一、主要組成部分
激光光源
激光共聚焦顯微鏡采用激光作為光源,激光束具有方向性強、發散小、亮度高等特點。
光源通常包括多個獨立的激光器,覆蓋可見光波長範圍,如405nm、458nm、488nm、515nm、559nm、635nm等,以適應不同染料的激發需求。
照明光路係統
激光束首先經過準直擴束透鏡組,變成一束直徑較大的平行光束。
然後,光束通過二向色鏡等光學元件進行偏轉和聚焦,*終落在樣品的焦平麵上。
照明光路係統還包括照明針孔,用於形成點光源,並對樣品進行掃描。
發射光路係統
樣品中的熒光物質在激光激發下發射熒光,熒光經過物鏡、二向色鏡、高通濾波片等光學元件後,被聚焦透鏡會聚在聚焦透鏡的焦點處。
然後,熒光通過探測針孔,由單點探測器接收。
發射光路係統還包括探測器前的針孔,用於減少探測器的有效麵積,提高成像質量。
共聚焦係統
共聚焦係統是激光共聚焦顯微鏡的關鍵部分,它確保照明針孔、探測針孔和被照射的樣品都處在彼此的共軛位置。
通過焦點共軛的技術,隻有焦平麵上的光才能通過探測針孔被探測器接收,從而得到清晰的共焦圖像。
其他光學元件
激光共聚焦顯微鏡的光路係統還包括其他光學元件,如反射鏡、透鏡組、光闌等,用於調整光路、控製光束的直徑和聚焦位置等。
二、工作原理
激光光源發出激光束,通過照明針孔形成點光源。
點光源經過物鏡聚焦後,對樣品進行掃描。
樣品中的熒光物質在激光激發下發射熒光。
熒光經過發射光路係統後,被單點探測器接收。
探測器將接收到的光信號轉化為電信號。
電信號經過計算機處理後,形成圖像並顯示出來。
三、應用
激光共聚焦顯微鏡具有高分辨率、高光敏度等特點,廣泛應用於生物學、醫學、材料科學等領域。例如,在生物學中,它可用於觀察細胞結構、蛋白質分布等;在醫學中,它可用於診斷疾病、研究藥物作用機製等;在材料科學中,它可用於觀察材料的微觀結構、缺陷等。
綜上所述,激光共聚焦顯微鏡的光路係統由激光光源、照明光路係統、發射光路係統、共聚焦係統和其他光學元件組成。這些組成部分共同協作,實現了高分辨率、高光敏度的成像功能,為科學研究和技術應用提供了有力的支持。