激光共聚焦顯微鏡對於樣品有特殊要求嗎

激光共聚焦顯微鏡對於樣品確實有特殊要求，這些要求因樣品類型的不同而有所差異。以下是對不同類型樣品的具體要求：

一、生物樣品

熒光表達：

在進行激光共聚焦顯微鏡測試前，應先在熒光顯微鏡下觀察熒光表達是否正常，以確定是否有必要使用激光共聚焦顯微鏡。

蓋玻片厚度：

蓋玻片的厚度要求≤0.17mm，以確保測試的準確性和避免對樣品的損傷。

激發與發射波長：

需要明確樣品的激發波長和發射波長，以便選擇合適的激光器和探測器進行測試。

掃描參數：

對於需要重構的樣品，需要明確掃描區域大小、位置和Z步進等參數，這些參數會影響測試時間和結果。

樣品固定：

樣品B須貼壁良好，不能懸浮起來。需要在載玻片上固定好後送樣測試。

對於貼壁細胞，可以將其鋪在孔板中的爬片上，按照實驗方案進行孵育、固定和染色後，將爬片的細胞麵扣置在滴有封片劑的載玻片上。也可將細胞直接培養在共聚焦專用培養皿中進行觀察。

對於懸浮細胞，可以用微量移液器吸取適量樣品滴加到載玻片上，用蓋玻片封片。

組織切片樣品需要采集適當大小的組織，經固定、冷凍包埋、冷凍切片、免疫熒光標記後，用蓋玻片封片。

抗熒光淬滅劑：

做顯微成像時，樣品需要加抗熒光淬滅劑，蓋玻片也需要固定。

二、材料樣品

樣品製備：

材料樣品需要提前製備好，並確保樣品平整。

樣品尺寸：

拍出來的樣品*大麵積應在1.11x1.8mm到5x5mm範圍內，顏色可調。但樣品的尺寸沒有嚴格要求。

三、其他注意事項

樣品質量：

載玻片和蓋玻片需要選擇質量好、光潔、無雜質的。對於重要實驗，需要提前檢查載玻片和蓋玻片的光學特性，確保無熒光幹擾。

樣品處理：

樣品需經熒光探針標記（可單標、雙標、三標）。

樣品表麵應盡量無氧化皮，觀察表麵應拋光，以保證表麵光潔度和平整度。粉末樣品應壓實，保證表麵平整。

綜上所述，激光共聚焦顯微鏡對於不同類型樣品有特殊要求，這些要求涉及樣品的熒光表達、蓋玻片厚度、激發與發射波長、掃描參數、樣品固定、抗熒光淬滅劑使用以及樣品質量和處理等多個方麵。為確保測試的準確性和可靠性，需要嚴格按照這些要求準備和處理樣品。