看微生物細胞形態用什麽顯微鏡 - 分析行業必一体育sport网页版登录

微生物的解釋：

個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。 微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。（但有些微生物是肉眼可以看見的，像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。）病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的“非細胞生物”，但是它的生存必須依賴於活細胞。根據存在的不同環境分為原核微生物、空間微生物、真菌微生物、酵母微生物、海洋微生物等。

微生物的作用和害處：

微生物對人類zui重要的影響之一是導致傳染病的流行。在人類疾病中有50%是由病毒引起。微生物導致人類疾病的曆史，也就是人類與之不斷鬥爭的曆史。在疾病的預防和治療方麵，人類取得了長足的進展，但是新現和再現的微生物感染還是不斷發生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治療藥物。一些疾病的致病機製並不清楚。大量的廣譜抗生素的濫用造成了強大的選擇壓力，使許多菌株發生變異，導致耐藥性的產生，人類健康受到新的威脅。一些分節段的病毒之間可以通過重組或重配發生變異，zui典型的例子就是流行性感冒病毒。

知道了微生物的具體定以後，實驗人員在對微生物進行研究時應該采用什麽類型的顯微鏡才能看到，用什麽顯微鏡能看到更好，對常見的微生物形態進行觀察和分析。

顯微鏡的發明是為了能看到人肉眼所不能看到的微笑物品，微生物的體積非常小，那麽必須借助顯微鏡對其進行放大觀察，加上微生物種類甚多，所以基本大部分的光學顯微鏡都能對微生物進行觀察，接下來的問題是，什麽樣的微生物應該用什麽類型顯微鏡來進行觀察和分析，常見的可做微生物形態觀察的顯微鏡有生物顯微鏡，相差顯微鏡，倒置顯微鏡，熒光顯微鏡，共焦顯微鏡等等。

下麵介紹各種不同的顯微鏡對微生物進行觀察：

  1．普通光學顯微鏡　　采用自然光或燈光為光源，其波長約為0.4μm。顯微鏡的分辨率為波長的二分之一，即0.2μm，而肉眼可見的zui小形象為0.2mm。故用油（浸）鏡放大1000倍，能將0.2μm的微粒放大成肉眼可見的0.2mm。普通光學顯微鏡可用於細菌、放線菌和真菌等的觀察。

      2．暗視野顯微鏡常用於觀察不染色微生物形態和運動。在普通顯微鏡安裝暗視野聚光器後，光線不能從中間直接透入，視野呈暗色，當標本接受從聚光器邊緣斜射光後可發生散射，因此可在暗視野背景下觀察到光亮的微生物如細菌或螺旋體等。 

      3．相差顯微鏡相差顯微鏡利用相差板的光珊作用，改變直射光的光位相和振幅，將光相的差異轉換為光強度差。在相差顯微鏡下，當光線透過不染色標本時，由於標本不同部位的密度不一致而引起光相的差異，可觀察到微生物形態、內部結構和運動方式等。

      4．熒光顯微鏡熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡基本相同，主要區別在於光源、濾光片和聚光器。目前大多數使用的是落射光裝置，常用高壓汞燈作為光源，可發出紫外光或藍紫光。濾光片有激發濾光片和吸收濾光片二種。用藍光的熒光顯微鏡除可用一般明視野聚光器外，也可用暗視野聚光器，以加強熒光與背景的對比。本法適用於對熒光色素染色或與熒光抗體結合的細菌的檢測或鑒定。

      5．電子顯微鏡用電子流作為光源，波長與可見光相比差幾萬倍，大大提高了分辨力，並用磁性電圈作為光學放大係統，放大倍數可達數萬倍或幾十萬倍，常用於病毒顆粒和細菌超微結構的觀察。 

對未染色的微生物標本進行觀察：

不染色標本一般可用於觀察細菌形態、動力及運動情況。細菌未染色時無色透明，在顯微鏡下主要靠細菌的折光率與周圍環境的不同來進行觀察。有鞭毛的細菌運動活潑，無鞭毛的細菌則呈不規則布朗運動。梅毒蒼白密螺旋體、鉤端螺旋體、彎曲杆菌等的活菌各有特征鮮明的形態和運動方式，具有診斷意義。常用的方法有壓滴法、懸滴法和毛細管法等。
      1．懸滴法在潔淨凹玻片的凹孔四周塗上凡士林，用接種環取一環菌懸液放在蓋玻片中央，再將凹玻片的凹孔對準蓋玻片中央的液滴並蓋上，然後迅速翻轉，輕壓蓋玻片，使其與凹孔邊緣的凡士林粘緊封閉後置高倍鏡下（或暗視野）觀察。
      2．壓滴法用接種環取一環菌懸液置於潔淨玻片的中央，在菌懸液上輕輕蓋上一蓋玻片，注意避免產生氣泡並防止菌懸液外溢，靜止數秒鍾後置高倍鏡下明視野（或暗視野）觀察。
      3．毛細管法主要用於厭養菌動力的檢查。通常選用60~70mm長。0.5~1.0mm孔徑的毛細管虹吸厭養菌懸液後，用火焰將毛細管兩端熔封。並用塑膠紙將毛細管固定在載玻片上，置高倍鏡下暗視野觀察。 

用顯微鏡對染色微生物標本進行觀察：

細菌標本經染色後，由於細菌與周圍環境間在顏色上形成鮮明對比，故在普通光學顯微鏡下可清楚地觀察到細菌的形態特征（如細菌的大小、形狀、排列等）和某些特殊結構（如莢膜、鞭毛、芽孢等），並可根據染色反應性對細菌加以分類鑒定。
  （一）細菌染色的一般程序細菌染色的一般程序是：塗片（幹燥）—固定—染色。
      1．塗片製備血液、分泌物、排泄物、穿刺液和液體培養物，直接在載玻片上作薄膜塗片；屍檢或感染動物組織，病變局部塗抹采樣的棉拭子直接塗片。固體培養基上的菌落或菌苔的製片，先用接種環取一環生理鹽水置載玻片中央，再用無菌接種環取少量的培養物在生理鹽水中磨勻，塗布成1cm2大小的塗麵，置室溫下自然幹燥或遠火慢慢烘幹。
      2．固定目的是殺死細菌，凝固細菌蛋白及結構，便於染色；促使細菌粘附在載玻片上，避免在水洗過程中被水衝掉；改變細菌對染料的通透性，有利於菌細胞內結構的染色。通常用火焰加熱固定，將已幹燥的塗片在火焰中迅速通過3次，以手背皮膚接觸玻片不燙為佳。
      3．染色根據檢驗目的不同，選擇不同的染色方法進行染色。染色時滴加染液，以複蓋度。
      4．媒染凡能增強染料和被染物的親和力，使染料固定於被染物及能引起細胞膜通透性改變的物質，稱媒染劑。常用的有明礬、鞣酸、金屬鹽和碘等，也有用加熱法促進著色。媒染劑可用於初染與複染之間，也可用於固定之後或含於固定液、染色中。
      ;   5．脫色凡能使已著色的被染物脫去顏色的化學試劑稱為脫色劑。常用乙醇、丙酮等作為脫色劑。脫色劑可以查出細菌與染料結合的穩定程度，作為鑒別染色之用。
      6．複染已脫色處理的細菌或其結構常以複染液作複染以便於觀察。複染液與初染液的顏色不同而成一鮮明對比。複染不宜太強，以免掩蓋初染的顏色。