光學顯微 鏡是光學儀器的一個大類,由荷蘭科學家胡克發明至今已有三百多年的曆史了,主要用於對微小物體的觀察與操作。經過數百年的不斷發展,目前已發展成包括生物、體視、金相、測量四大類產品,同時結合各類技術成果形成了攝影、攝像、共焦掃描、熒光、偏光、暗場、相襯等一係列變形產品。光學顯微鏡文泛應用於生物、基因工程、新材料、微電子、工業測量、微機械、*刑偵、醫療、教學等領域的科研與生產製造過程。
一、工作原理
1、 光學顯微鏡是利用光波(電磁波的一個譜段:可見光波長範圍是:400nm~700nm:近紫外區域為300nm~400nm:近紅外區域為700nm~1500nm。)的折射成像或折反射成像原理,研製的光學成像儀器。但是由於光波長的限製,在可見光波段內常規光學顯微鏡的有效放大倍率在1600倍左右,超過1600倍的放大倍率對提高光學係的分辨率並無貢獻。
2、 顯微鏡一般由物鏡係統、棱鏡係統、目鏡、對焦機構、照明係統、支架、工作台等幾大部分構成。
3、 基本原理是:顯微鏡物鏡將標本放大成像(一次成像),顯微鏡目鏡將物鏡所成的像進行二次大成像(二次像)、成像在無窮遠或人眼的明視距離處,再由觀察者眼睛的光學係統將“二次像”成像到本人眼睛的視網模上,大腦中即可獲得標本的顯微圖像信號。
4、 光學顯微鏡總的放大倍率:β總=β物×β目(式中:β物是物鏡放大倍率,β目是目鏡放大倍率)。
如果顯微鏡附帶有攝像裝置,計算攝影攝像裝置放大倍率的公式是:β總=β物×β目β攝(式中:β攝是攝影或攝像接口裝置中光學係統的放大倍率)。
二、產品分類
二、體視顯微鏡
(1) 體視顯微鏡顧名思義就是具有立體視覺的顯微鏡,也叫實體顯微鏡。主要結構特點是:光學係統必須有左右兩條“光路”分別對標本進行成像,而且左右兩條“光路”之間必須有一定的夾角(稱為體視角,一般在10°~12°範圍),模擬人的雙眼觀察有限距離物體時的狀態,以形成立體視覺、便於在顯微鏡的物方(物鏡前方的簡稱)進行空間定位或對標本進行鏡下操作。因此,體視顯微鏡廣泛應用於科研與生產過程中各類顯微操作場合、成為不可或缺的得力工具(克隆技術中的細胞顯微操作、集成電路引線焊接與封裝、醫療 顯微外科手術等),具有廣闊的市場。
(2) 體視顯微鏡按結構形式有:固定率體視顯微鏡、間隔變倍體視顯微鏡、連續倍體視顯微鏡三類,分別屬於低檔、中檔和中產品,適用於不同場合。為了滿足記錄、傳播標本顯微鏡圖像的要求,還有具備攝影攝像、功能的體視顯微鏡,簡稱“三目體視顯微鏡”,可以通過攝影、攝像接口連接各類照相機、攝像機和數碼相機。
(3) 因體視顯微鏡的應用特點,一般產品的放大倍率範圍為:2X~200X。進口產品有達到400X以上的,但放大倍率到200X以上後由於“光學景深”(通過光學係統觀察的標本深度)太短,儀器已沒有立體視覺,隻是起一般的平麵放大作用了。
(4) 體視顯微鏡的主要技術指標有:放大倍率與倍率範圍、視場直徑、物方工作距離、物鏡變倍比(連續變倍體視顯微鏡)等。
(5) 部件配置及常規參數
①附加物鏡:
0.3X、0.5X、0.7X、1.5X、2.0X、2.5X為常用規格。
采用平行光路的產品有1.0X物鏡。根據特殊要求還可以開發設計製造特殊規格的附加物鏡。
②目鏡係列:
10X、15X(16X)、20X、25X為常用規格。
另外為適應戴眼鏡觀察,有“高眼點目鏡”;視場角大於45°的目鏡稱為“廣角目鏡”。根據應用要求還可以設計製造特殊規格的目鏡。
(6)由於體視顯微鏡的應用範圍非常廣闊、操作使用的要求差異很大,為了充分發揮其使用效能、提高工作效率,有各類附件供選配。
①照明光源:
光源支架(帶落射鹵素燈與透射熒光或鹵素燈)、可調鹵素燈(50W)、環形熒光燈、光導纖維冷光源(可配單端、雙端、環形等光纖,用於不允許有紅外線輻射的場合)、LED光源、偏光裝置、暗場聚光裝置(用於寶石、透明礦物等標本的簽定)
②支架係統:
單橫杆萬向支架、雙橫杆萬向支架、擺臂平衡式萬向支架、微動支架
③移動平台:
2維平移工作台、3維移動工作台(可傾斜、加1個旋轉軸)、集成電路矽片檢查工作台、測量工作台(X、Y方向10MM行程、0.01MM度)
④測微分劃尺:
目鏡分劃尺(0.1MM~0.05MM格值,“一字”“一字”、“十字”、“網格”等形式)物鏡分劃尺(0.01MM格值)
⑤顯微攝影攝像裝置:
袖珍變焦數碼相機攝影接口、單反數碼相機接口、35MM單反相機接口、工業CCD攝像機接口、DV攝像機接口。
2、 生物顯微鏡
(1) 生物顯微鏡主要用於動植物組織切片、細胞與細菌塗片等標本的微細組織結構觀察。隨著生物工程和基因工程的發展,也是胚胎移植、克隆技術*的重要工具。生物顯微鏡主要追求zui高的細節分辨率、有效放大倍率、更寬廣的視野直徑等技術指標。
(2) 生物顯微鏡常規結構形式:
①透射照明正置式顯微鏡:為常見方式,其中低檔普及型又有雙目和單目兩種機型;
② 透射反射照明正置式顯微鏡:一般為或研究型產品;
③透射照明倒置式顯微鏡:可透過玻璃培養皿底部觀察其中活性生物組織或細胞的狀態,同時可以對這些活性生物組織或細胞進行顯微操作:
④透射反射照明倒置式顯微鏡:用途與透射照明倒置式顯微鏡基本相同,但還可以觀察不透明標本。
⑤根據應用場合生物顯微鏡又大致分為:普及型(全部采用消色差物鏡)、中檔產品(可選配平場消色差物鏡、攝影攝像裝置,可添加反射照明等裝置)、研究型產品(基本配置平場消色差物鏡或更的平場複消色差物鏡、攝影攝像接口、反射照明裝置,有熒光、偏光、暗光、相襯等功能組件供選配)。
(3)生物顯微鏡主要部件有:
支架、移動工作台與標本夾、對焦機構、物鏡轉換器(按安裝物鏡的數量有3孔、4孔、5孔、6孔等規格)、觀察係統(分單目、雙目、三目即含攝像接口3種形式)、照明係統(包括聚光鏡、照明燈、供電與調光電路等)、目鏡等。
由於生物顯微鏡產品標準化程度較高,國產中低檔產品不同廠家的區別主要在於光學係統質量和外觀。
(4)生物顯微鏡的主要技術規範與指標
①放大倍率與倍率範圍:40X~1600X(常規範圍);
②目鏡視場直徑:10X目鏡一般為φ18MM~φ22MM,進口產品有達到φ26MM的:
③物鏡規格:4X、10X、40X、100X是常規規格(其中100X物鏡為獲得極限分辨率通常是“油鏡”,即在物鏡前鏡片與標本“數值孔徑”,進而提高物鏡分辨率,外觀標“OIL”字樣),此外有2X、20X、25X、50X、60X、90X等規格,物鏡倍率用不同的外觀“色環”和數字來區分:
④物鏡品種:消色差、平場消色差、平場複消色差、相襯、暗場