激光共聚焦顯微鏡樣品製備方法步驟如下：

1、樣品準備：選擇合適的細胞或組織樣品，可以使用活體細胞、培養細胞、切片等多種樣品。樣品應該具備較好的生物活性和顯微結構。

2、樣品固定：為了保持樣品的形態和結構，需要進行樣品的固定處理。根據不同的樣品類型和研究目的，可以選擇適合的固定方法，如甲醛、乙醇、冰醋酸、戊醛等。

3、滲透處理：有些樣品在固定後會出現浸泡不透的情況，需要進行滲透處理，以保證樣品充分浸透。

4、切片製備：對於需要進行觀察的樣品，需要進行切片製備。切片厚度應該根據研究目的和樣品類型來確定，一般在2-5微米之間。

5、熒光標記：對於需要進行熒光標記的樣品，可以采用免疫熒光標記技術進行標記。根據研究目的和樣品類型，選擇適合的抗體和熒光染料進行標記。

6、封片和保存：將製備好的樣品進行封片處理，以防止熒光染料揮發和樣品汙染。封片後將樣品保存於4℃或-20℃冰箱中備用。

7、激光共聚焦顯微鏡觀察：將製備好的樣品置於激光共聚焦顯微鏡中，進行觀察和拍照。觀察時可以選擇不同的激發波長和發射波長，以獲取Z佳的熒光信號。

以上是激光共聚焦顯微鏡樣品製備的一般步驟，具體操作可根據研究目的和實驗要求進行調整。