在日常生活中,室內飛揚的微粒灰塵是不易被看見的,但在暗的房間中若有一束 光線從門縫斜射進來,灰塵便粒粒可見了,這是光學上的丁達爾現象。暗視野顯微鏡就是利用此原理設計的。它的結構特點主要是使用中央遮光板或暗視野聚光器,常用的是拋物麵聚光器,使光源的中央光束被阻擋.不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光線改變途徑,傾斜地照射在觀察的標本上,標本遇光發生反射或散 射,散射的光線投入物鏡內,因而整個視野是黑暗的。
在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像.並非物體的本身,所以隻能看到物體的存在和運動,不能辨清物體的細微結構。但被檢物體為非均質時,並大於1/2波長,則各級衍射光線同時進入物鏡,在某種程度上可觀察物體的構造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細微結構,但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運動,這是普通顯微鏡(*大的分辨力為0.2um)所不具有的特性,可用以觀察活細胞的結構和細 胞內微粒的運動等。