隨著科學的發展的FISH技術也越來越成熟,從建立了非放射性原位雜交技術到如今的多色熒光原位雜交(M-FISH)、 DNA纖維熒光原位雜交技術(DNA fiber-FISH)熒光免疫核型分析和間期細胞遺傳學(FICTION)。FISH技術和FISH用熒光顯微鏡被越來越多人了解,認識和用到。
下麵由顯微鏡廠家——天津Bsports必一体育光學來給您介紹下FISH用熒光顯微鏡的應用。
一、FISH用熒光顯微鏡應用於染色體結構變異與非整倍體的檢測
(1)操作簡便,立體分辨率高,觀察分析方便,信號明亮清晰以及安全風險小;
(2)檢測速度及探針穩定性比放射性標記探針好,探針標記後穩定,一次標記後可使用二年;
(3)方法敏感,能迅速得到結果;
(4)在同一標本上,利用不同顏色的熒光集團標記探針可同時檢測幾種不同的探針;
(5)不僅可用於分裂期細胞染色體數量或結構變化的研究,而且還可用於間期細胞的染色體數量及基因改變的研究;
(6)標記探針和熒光素試劑均可購置,使得FISH程序直接而可靠;
(7)某種特別種類的完整基因組、整個染色體、染色體亞區域或單拷貝序列依所用探針的複雜性可特異地分別開來;
(8)重複序列的雜交可被未標記基因組的DNA同探針預雜交而抑製,這對定位在大植入探針中的獨特序列是決定性的。
二、FISH用熒光顯微鏡應用於基因擴增和缺失的檢測
FISH空間分辨率和敏感性使得親本和擴增基因在抗病蟲害細胞中定位成為可能。被擴增基因主要在同一染色體臂上,但離初始親本基因 有一定距離,且經常獨立地位於染色體端粒部位;FISH分析表明細胞斷裂可能是由於染色體含有擴增區域的結構重排。同時用FISH 可定 位轉基因植物中外源基因位置和拷貝數,此法在番茄、煙草、大麥、小麥、黑麥等作物中已獲成功。利用FISH技術也可檢測一些與遺傳 性疾病相關的基因缺失,如成功檢測了aniridia疾病患者的缺失基因。
三、FISH用熒光顯微鏡應用於基因定位
熒光原位雜交技術可以直接測定DNA序列在染色體上的定位情況,基因的染色體定位是FISH在分子生物學上應用的重要方麵。熒光原位雜交(FISH)技術還為當前著絲粒結構研究提供了重要的研究手段,主要是對著絲粒重複序列的分析,包括重複元件,如α、β和傳統衛星DNA的性質和分布。FISH可以直接觀察染色體端粒,簡化了對其在核內的結構和功能研究,定位其端粒序列。
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